
大约十年前,周斌在研究心肌干细胞是否存在时发现,必须发展新技术,才能回答此类科学问题。于是,他带领当时刚进入实验室的研究生何灵娟,开始了新技术的钻研之路。

“其实,最困难的是做决定。”周斌解释说,建立一种新的实验技术,验证对错可能就需要等至少两年,如果失败,则要一切重来,因为成本太高,很多人不想冒险,也不愿投入。
不过,性格执着的周斌还是决定闯一闯这座“独木桥”。幸运的是,2013年,中科院院士李林出任中国科学院上海生命科学院院长,2014年设立院长基金,鼓励天马行空的独立探索,周斌的项目成为唯一获得支持的项目。
怎样才能在细胞的海洋中,标记出那些刚完成增殖的新生肝细胞?又如何将新生肝细胞与巨噬细胞、内皮细胞等其他细胞的增殖信号区别开来?这就好像在茫茫宇宙的各种杂乱辐射中,一眼锁定来自新生恒星的特定光谱。

图中红色信号即是新生的肝细胞,集中在肝小叶的中间区。
“传统检测细胞增殖的方法,好比用相机拍照,只能拍摄一个瞬间。”周斌说,他们发展的新方法可以像录像机一样,为每个新生肝细胞留下“诞生”的痕迹——在小鼠体内,一旦肝细胞发生增殖,新生肝细胞就会被荧光蛋白“点亮”,给增殖的肝细胞打上“唯一标记”。无论肝细胞增殖在何时、何地发生,只要对小鼠进行荧光检测,就能清楚看见一段时间内所有的新生肝细胞。
由此,研究组“一锤定音”:新生肝细胞主要集中在肝小叶的zone2中。“在追踪图片上看起来,这些增殖细胞集中的区域,就像一个个迷你甜甜圈。”何灵娟说。

一个被Protracer荧光标记的肝脏,红色信号代表增殖的肝细胞,呈现出“甜甜圈”的形状。
经过十年的不断优化、完善,如今这一技术已非常成熟,不仅可以追踪新生肝细胞,还能对神经细胞、巨噬细胞、胰岛β细胞、成纤维细胞等多种细胞的增殖进行长时间全程追踪。





